Generic HCP ELISA Kit 

HEK293 l 360-HCP ELISA KITS

 

HEK293(인간 배아 신장 유래 293) 세포 및 그 파생 세포주는 재조합 단백질 개발이나 아데노바이러스 생산을 위한 이종(heterologous) 발현 시스템으로 특히 유용합니다. 가장 큰 장점 중 하나는 단백질 분자에 대해 사람과 유사한 번역 후 수식(post-translational modifications) 을 수행할 수 있다는 점으로, 최종 산물의 원하는 생물학적 활성을 확보하는 데 기여합니다. 

 

또한 HEK293 세포는 높은 형질도입(transfection) 효율을 보여 고품질 재조합 단백질 생산에 적합합니다. 더불어 배양 및 유지가 용이하고, 이온 채널 및 수송체와 같은 막단백질을 효율적으로 발현할 수 있어 구조생물학 및 전기생리학 연구에도 우수한 선택지입니다. 

 

이러한 바이오엔지니어링 분야의 발전을 지원하고자, Biogenes 사는 바이오엔지니어링 분야의 혁신을 위해 두 가지 범용 키트로 구성된 HEK29 ELISA Kits 를 제공 합니다.

 

 

 

2가지 타입의 HEK293 ELISA 키트

 

HEK293 | 360-HCP ELISA 키트는 서로 다른 anti-HCP 항체 세트를 기반으로 합니다. 각 항체는 HEK293 모의 발효(mock fermentation)에서 유래한 상등액(SN) 또는 세포용해물(CL) 을 항원 분획으로 사용하여 항체를 생성 및 개발하였습니다.

 

 

Type	Cell Line	Antigen	Species
SN	HEK293	Supernatant	Rabbit
CL	HEK293	Cell lysate	Rabbit

 

HHEK293 HCP ELISA 은 ICH 가이드라인 ICH Q2(R1) (“Validation of analytical procedures: text and methodology”) 에 따라 BioGenes 사에서 적격성 평가(qualification) 를 수행하였습니다.

 

항체 조제물(SN & CL)의 높은 특이성은 IAC + 2D DIGE 분석을 통해 HEK293 SN 항원 분포에 대해 74%, HEK293 CL 항원 분포에 대해 85% 의 커버리지로 입증되었습니다. 두 키트 모두에서 회수율(recovery rate)은 분석법의 작업 범위(working range) 내 농도로 항원을 첨가한(spike) 시료에서 평가되었으며, 첨가한 항원의 100±30%가 회수되는 것을 기준으로 설정하였습니다.

 

HEK 293 | 360-HCP ELISA Kit 의 뛰어난 감도는 높은 감도는 검증(밸리데이션) 파라미터인 LOD와 작업 범위(working range) 로 나타낼 수 있으며, 자세한 내용은 아래와 같습니다:

 

•  LOD :                  ≤ 1.0 ng/mL

•  Working range :     ~ 3 - 100 ng/mL

 

Reagent Characterization Reports (types CL and SN) 및 Qualification Report 는 02-2644-1991 / is@insung.net 로 요청 주시기를 바랍니다.

 

 

 

Generic ELISA 키트 개발(제조) 과정

 

Enhanced 360-HCP ELISA 키트(E.coli, CHO, HEK293)는 일반적으로 다음 단계로 제조됩니다.

 

•  서로 다른 항원 물질을 사용하여, 서로 다른 동물 코호트 및/또는 종(species) 을 면역화

•  각 다클론 항체 세트(polyclonal antibody sets) 의 친화성 정제(affinity purification) 및 생산

•  ELISA 개발, 적격성 평가(qualification) 및 실시간 안정성(real-time stability) 시험

•  즉시 사용 가능한(ready-to-use) ELISA 키트 제조

 

각 키트 타입의 항체는 전체 단백질 프로파일 중 특정 단백질 하위 집합(subset) 에 대해 특이적인 반응성을 보이며, 동일 균주/세포주 내의 다른 단백질들에 대해서는 반응성이 약하거나 거의 없을 수 있습니다. 전체 단백질 집단 중 검출(인식)되는 단백질의 비율을 커버리지(coverage) 라고 합니다.

 

 

 

360-HCP ELISA 의 우수성

 

360-HCP ELISA는 바이오틴 표지 항체를 Streptavidin–POD(Peroxidase) 결합체로 검출하여 재현성 있는 결과를 확보하도록 설계되었습니다. 또한 2단계(two-step) 프로토콜을 적용해 비특이적 결합(nonspecific binding) 을 감소시키고, 표준(stock) 용액을 포함하여 제품 안정성과 운용 유연성을 높였습니다. 아울러 360-HCP ELISA 키트는 자동 플레이트 워셔(automated plate washing) 에 최적화되어, 실험 효율을 향상시킵니다.

 

 

 

가장 적합한 ELISA 키트 선택 시 고려사항 

 

각 의약품 제조 공정은 고유한 HCP(숙주세포단백질) 프로파일을 형성합니다. 따라서 최적의 HCP 모니터링을 위해서는 공정 및 시료에 가장 적합한 키트를 선정하기 위한 적합성 평가(evaluation study) 를 수행하는 것이 바람직합니다. 그림에서 보듯이, 예시 프로젝트 시료에서 Kit 1은 Kit 2에 비해 더 폭넓은 범위의 HCP를 커버(검출)합니다. 따라서 전반적인 커버리지가 더 우수한 Kit 1이 HCP 감소(저감) 모니터링을 수행하는 데 더 적합한 선택이 됩니다.

 

가장 적합한 범용 360 HCP ELISA 키트를 선정하기 위해 BioGenes는 HCP 커버리지, 충분한 HCP 로그 감소(log-reduction), ELISA 정확도(accuracy), 시료 희석 직선성(dilution linearity) 등 핵심 성능 지표를 함께 평가할 것을 권장합니다.

 

 

 

 

이 인포그래픽은 바이오의약품 제조에서 공정에 가장 적합한(best-fit) HCP ELISA 키트를 선정하는 과정을 설명합니다. 각 제조 공정은 고유한 숙주세포단백질(HCP) 프로파일을 생성하므로, 최적의 HCP 모니터링을 위해서는 평가 연구(evaluation study) 가 필요합니다. 본 비교에서 Kit 1은 시료 내 HCP 검출에 대해 Kit 2보다 더 넓은 항체 커버리지를 보여, HCP 저감(HCP reduction) 모니터링에 더 적합한 선택지입니다. BioGenes는 가장 적합한 360 HCP ELISA 키트를 선정하기 위해 HCP 커버리지, 로그 감소(log-reduction), 정확도(accuracy), 시료 희석 직선성(sample dilution linearity) 등 핵심 ELISA 성능 지표를 평가할 것을 권장합니다.

 

Category	Product No.	Product Name	Amount per Unit
StarterSet	IP3001	HEK293|360-HCP ELISA Starter Set(Types CL & SN)	2 kits
SingleKit	IP301	HEK293|360-HCP ELISA Type CL	1 kit
	IP302	HEK293|360-HCP ELISA Type SN	1 kit
Antibody*	IP311	Anti-HEK293 antibody, Type CL	0.5 mg
Antibody*	IP312	Anti-HEK293 antibody, Type SN	0.5 mg
Standard*	IP321	HEK293-CL-HCP Standard	0.1675 mg
Standard*	IP322	HEK293-SN-HCP Standard	0.13 mg

 

 

ELISA 키트 포함 품목 :

•  Pre-coated 96-well microtest plate

•  Standard E.coli-HCP

•  Antibody conjugate

•  Enzyme conjugate

•  Washing buffer

•  Assay buffer

•  Substrate buffer

•  Stop solution